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微生物基因編輯

泓迅生物擁有獨特的“GPS”平臺，在基因型（Genotype）、表型（Phenotype）的基礎上引入了人工合成型（Synotype），提供基因“讀-寫-編”一體化平臺。泓迅生物依托專利的合成及組裝平臺，結合經(jīng)驗豐富的CRISPR-Cas9技術，已在大腸桿菌細胞和酵母細胞中建立了CRISPR基因編輯系統(tǒng)。

服務優(yōu)勢

可精確到堿基對且無選擇標記殘留
可高精度編輯任意基因
多重位點編輯
實驗周期短

服務詳情

服務項目	E. coli 基因敲除	E. coli 基因敲入	酵母基因敲除	酵母基因敲入
向導RNA設計	敲除菌株構建
客戶提供的資料	? 需要編輯的菌株以及菌株的基本信息。 ? 需要敲除基因和敲除序列的信息；或者敲入位點和替換序列的信息。
交付內容	編輯過的菌株
質量管理	? 測序數(shù)據(jù) ? COA
交付周期	4周起
價格	咨詢

在線咨詢

服務流程

案例分享查看詳細

案例一分析：CRISPR-Cas9技術敲除酵母菌ADE1基因

泓迅生物利用CRISPR-Cas9技術編輯酵母菌中的一個920bp的ADE1基因。ADE1是腺嘌呤合成相關基因，如果ADE1失活，則細胞將會積累紅色色素，呈現(xiàn)紅色菌落。

陽性克隆菌落

基因敲除

測序結果顯示，轉化子的ADE1基因缺失了18個堿基，被成功編輯。

案例二分析：CRISPR-Cas9技術將熒光蛋白基因敲入大腸桿菌

泓迅生物研究人員通過開發(fā)完善CRISPR-Cas9雙質?；蚓庉嬒到y(tǒng)及其生產(chǎn)工藝，成功將906bp的紅色熒光蛋白（mScarlet）編碼基因敲入到菌株E.coli的NC101基因組上 Clbp編碼區(qū)域，敲入成功率高達96.6%~100%。

大腸桿菌基因編輯

圖1 mScarlet基因敲入后克隆子的PCR鑒定電泳圖

雙質?；蚓庉? />
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圖2 mScarlet基因敲入后大腸桿菌基因組序列。（a）敲入位點上下游基因圖譜及測序組裝示意圖，（b）敲入位點上下游測序序列峰形圖。
</p>
<p style= 大腸桿菌基因敲入

圖3 熒光顯微鏡下大腸桿菌NC101突變株細胞圖像。（a）白光下細胞圖片，（b）594 nm光源激發(fā)后細胞圖片。

常見問題

CRISPR/Cas9介導的微生物編輯難點在哪里？

培養(yǎng)條件與轉化方法的多樣性：不同微生物對生長環(huán)境的需求各異，這導致在實驗室條件下培養(yǎng)它們時需要采用特定的條件。同樣，將外源DNA導入這些微生物的轉化方法也各不相同，增加了操作的復雜性。
質粒與元件在不同物種間的表達差異：質粒和其他基因編輯元件在不同微生物中的表達效率可能大相徑庭。這要求研究人員必須針對目標微生物進行質粒的個性化設計和優(yōu)化，以確保基因編輯的成功進行。
Cas蛋白敏感性與編輯效果的差異：不同微生物對Cas蛋白的敏感性不同，這直接影響到基因編輯的效率和準確性。因此，針對不同微生物，可能需要篩選和優(yōu)化特定的Cas蛋白變體，以獲得最佳的編輯效果。
微生物自身DNA修復機制的多樣性：微生物具有不同的DNA修復機制，這些機制在基因編輯過程中可能起到干擾作用。了解并應對這些修復機制，對于提高基因編輯的成功率和減少脫靶效應至關重要。