多克隆抗體特點:
1.識別任一抗原上的多個表位,所得血清為異質(zhì)性抗體混合物,親和力各有不同
2.主要有IgG亞類組成
3.通常使用多肽免疫原制備以獨有表位為靶標(biāo)的多克隆抗體,尤其是針對高同源性蛋白家族
優(yōu)劣勢:
1. 高親和性:由于靶蛋白上的多個表位能夠結(jié)合不止一個抗體分子,多抗可放大低表達(dá)水平靶蛋白的信號
2.可識別多個表位,有利于免疫沉淀和染色質(zhì)免疫沉淀實驗獲得更好的結(jié)果
3.與相似抗原有更多交叉反應(yīng),可放大低表達(dá)信號,染色背景干擾較高
4.對微小抗原變化的包容性更強(qiáng),可檢測同源性的蛋白家族
單克隆抗體特點:
1. 識別一個抗原上的單一抗原表位
2.僅由一種抗體亞型組成(IgG1、IgG2、IgG3)如需使用二抗進(jìn)行檢測,應(yīng)針對正確的亞類選擇抗體
優(yōu)劣勢:
1.高特異性:單抗適用于實驗中的一抗,產(chǎn)生背景染色信號通常顯著低于多克隆抗體
2.與多抗相比,同質(zhì)性較高,結(jié)果重現(xiàn)性較高
3.特異性地檢測一個靶表位,不易與其它蛋白發(fā)生交叉反應(yīng),染色背景干擾低
4.檢測單一抗原或蛋白質(zhì)家族的單一成員